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伊人影院增殖实验服务

伊人影院增殖是伊人影院蕉久影院在线体生长、发育、繁殖、遗传的基础,是伊人影院最基本的生理活动。生长因子、激素及癌基因产物等均可诱导伊人影院的增殖或抑制伊人影院的增殖,通过影响伊人影院周期、诱导伊人影院凋亡而实现。

客户需提供:

1、初步实验方案

2、目的伊人影院或目的伊人影院信息

3、实验分组及方案确认

北纳将完成:

1、伊人影院预实验:确保实验可以按照设计方案进行

2、实验检测:根据预实验数据和客户要求进行正式实验

3、实验报告:提供原始数据和数据分析结果

 

MTT检测伊人影院增殖

MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的检测伊人影院存活和生长的方法之一,其检测原理为活伊人影院线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在伊人影院中,而死伊人影院无此功能。二甲基亚砜能溶解伊人影院中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定伊人影院数范围内,甲瓒结晶形成的量与伊人影院数成正比,因此490nm波长处的吸光值可间接反映活伊人影院数量。该方法已广泛用于抗肿瘤药物筛选、伊人影院毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

北纳实验实例:

向96孔板每孔加入2000个伊人影院培养过夜,用不同浓度药物处理伊人影院24 h和48 h,向孔板中加入MTT溶液,孵育4h。最后去除MTT,加入二甲基亚砜溶解,酶标仪读取OD490时的吸光值,计算存活率。

结论:加药处理后,伊人影院生长受到抑制。

基本收费:1000元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费

 

克隆形成实验

是测定伊人影院的增殖能力的有效方法之一。单个伊人影院在体外持续6代以上,其后代所组成的伊人影院群称为克隆。这时每个克隆含有50个以上的伊人影院,大小在0.3~1.0mm之间,通过计数克隆形成率,可对单个伊人影院的增殖潜力做定量分析,了解伊人影院的增殖能力和独立生存能力。

应用实例

平板克隆形成:在6孔板中接种500个伊人影院/孔,用不同浓度药物处理伊人影院48 h,更换新鲜培养基静置培养2周左右,中途隔3天换液并观察伊人影院状态,出现肉眼可见的克隆即终止培养,用多聚甲醛固定1h,再用台盼蓝染色并计数。得到的实验结果如下:

实验结论:药物处理后伊人影院克隆形成能力减弱。

基本收费:500元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费

 

伊人影院周期

伊人影院周期指伊人影院一代所经历的时间。从一次伊人影院分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。伊人影院周期反应了伊人影院增殖速度。伊人影院周期检测最常用的是PI渗入测定伊人影院周期。PI,即碘化丙锭,可以与伊人影院内DNA 和RNA 结合,采用RNA酶将RNA消化后,通过流式伊人影院术检测到的与DNA 结合的PI 的荧光强度直接反映伊人影院内DNA含量的多少。由于伊人影院周期各时相的DNA 含量不同,通常正常伊人影院的 G0/G1 期具有二倍体伊人影院的DNA 含量(2N),而G2/ M 期具有四倍体伊人影院的DNA 含量(4N),而S 期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此,通过流式伊人影院术PI染色法对伊人影院内DNA 含量进行检测时,可以将伊人影院周期各时相区分为 G0/G1 期,S 期和G2/ M 期,并可通过软件计算各时相的百分率。

应用实例

同一药物浓度分别处理伊人影院24 h和48 h,洗涤消化并用预冷的70% 乙醇溶液固定伊人影院过夜,PI染色,流式伊人影院仪检测,得到的周期实验结果如下:

实验结论:药物处理伊人影院后,处于G2期的伊人影院显著增加,处于G1期的伊人影院显著减少,提示药物影响伊人影院的周期分布。

基本收费:500元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费

 

伊人影院凋亡

是指伊人影院在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。通常使用Annexin V/PI双染法检测伊人影院凋亡,该法省时,简单,结果可靠,可区分早期与晚期凋亡,是目前最为常用的检测伊人影院凋亡的方法。

应用实例

药物处理伊人影院12 h、24 h和48 h后,消化并收集伊人影院,用PBS洗涤伊人影院三次,加入Annexin V和PI双染,流式伊人影院仪检测。

实验结论:药物处理伊人影院后,随着处理时间的延长,凋亡伊人影院显著增加。

基本收费:500元/板,重复3次。

注:可根据具体实验项目协商收费